上海奧法美嘉生物科技有限公司
已認(rèn)證
上海奧法美嘉生物科技有限公司
已認(rèn)證
復(fù)雜注射劑之脂質(zhì)體的表征與解決方案
上海奧法美嘉生物科技有限公司 2023/05/16 | 閱讀:707
產(chǎn)品配置單: 方案詳情:
復(fù)雜注射劑之脂質(zhì)體的表征與解決方案 脂質(zhì)體粒徑控制的重要性納米脂質(zhì)體 (nanoliposomes) 是一種具有類細(xì)胞膜磷脂雙分子層的納米囊泡體,因?yàn)榱字瑢优c細(xì)胞膜的結(jié)構(gòu)類似,可以與細(xì)胞膜融合,從而將藥物送入細(xì)胞核中。脂質(zhì)體載體的釋藥機(jī)制,使其不但可以增加藥物溶解度,還具有潛在的緩釋或靶向特性,廣受研發(fā)人員的青睞,全球范圍內(nèi)已有 10 余種注射用脂質(zhì)體產(chǎn)品獲批上市。 納米藥物與其他藥物一樣,必須具有安全性、可控性與有效性,有效性是納米藥物實(shí)現(xiàn)疾病治療的基礎(chǔ)。脂質(zhì)納米注射劑經(jīng)給藥在體內(nèi)運(yùn)轉(zhuǎn)時(shí),需要克服多重生理/病理屏障,才能安全到達(dá)靶點(diǎn)發(fā)揮治療作用,在發(fā)揮其藥效前需要克服血液、組織、細(xì)胞和細(xì)胞器等多重屏障。[1]通過調(diào)控納米藥物本身的物理化學(xué)性質(zhì),如納米藥物的大小、形狀、表面電荷等,一定程度上能夠克服藥物遞送障礙。[2] 相比于傳統(tǒng)注射劑,脂質(zhì)體具有靶向作用,可減輕藥物的毒副作用,機(jī)體器官對不同粒徑微粒的阻留能力不同,可通過脂質(zhì)體注射劑的粒徑控制實(shí)現(xiàn)藥物被動(dòng)靶向效果。[3]脂質(zhì)體粒徑小于50nm時(shí)一般都能夠靶向至脾組織;在50~100nm時(shí)能靶向至肝組織;在0.1~0.2μm時(shí)能夠靶向至肝組織肝巨噬細(xì)胞的溶酶體;在7~12μm時(shí)可被肺組織細(xì)胞攝??;>12μm時(shí)能夠被毛細(xì)血管上皮細(xì)胞攝取進(jìn)而到達(dá)荷瘤組織內(nèi);>15μm時(shí)能被腸系膜動(dòng)脈等血管上皮細(xì)胞攝取[4]。 脂質(zhì)體的粒徑直接影響藥物的釋放、生物利用度、載藥量、靶向性等,在制備時(shí)應(yīng)控制粒子的大小,獲得較窄且均勻的粒度分布。
脂質(zhì)體制備流程概述在脂質(zhì)體的制備方法中有多種制備方法,傳統(tǒng)的方法如:薄膜水化法、溶劑注入法、逆向蒸發(fā)法等。這些方法幾乎都是先將脂質(zhì)溶解在有機(jī)溶劑中,然后再去除有機(jī)溶劑。另外,也有大量的非傳統(tǒng)制備方法用于研究,如超臨界流體(supercritical fluid, SCF)、微流體技術(shù)、冷凍干燥法。此處,介紹一種脂質(zhì)體的制備流程,見圖1,通過傳統(tǒng)方法制備粒徑比較大的粗脂質(zhì)體,在除去有機(jī)溶劑后,再通過微射流均質(zhì)的方式進(jìn)一步降低粒徑及進(jìn)行整粒;而后通過超濾進(jìn)行純化,得到粒徑均一、滿足使用安全要求的脂質(zhì)體。脂質(zhì)體的平均粒徑和粒度分布是脂質(zhì)體藥品關(guān)鍵質(zhì)量特性,顯著影響其體內(nèi)行為。溶解磷脂可能需要用到毒性比較大的有機(jī)溶劑,溶劑殘留需要符合ICH相關(guān)規(guī)定,除去可能存在困難。超濾是影響粒徑和溶劑殘留的關(guān)鍵工藝,也是達(dá)到控制的最后一步工藝。[5] 圖1 脂質(zhì)體制備與表征流程圖 脂質(zhì)體粒度控制 脂質(zhì)體給藥系統(tǒng)屬于非均相熱力學(xué)不穩(wěn)定系統(tǒng),脂質(zhì)體在制備過程中,若粒徑大小及分布不合格,則會(huì)影響產(chǎn)品 后續(xù)質(zhì)量問題。粗脂質(zhì)粒需要經(jīng)過高壓均質(zhì)或微射流進(jìn)行整粒,而后進(jìn)行超濾純化,得到粒徑均一的脂質(zhì)體。高壓微 射流均質(zhì)機(jī)具有大規(guī)模、連續(xù)化生產(chǎn)等特點(diǎn),通過高速撞擊、剪切與空穴作用達(dá)到均質(zhì)與細(xì)化的目的,現(xiàn)已有用于制 備阿糖苷、中鏈脂肪酸、茶多酚及維生素C等納米脂質(zhì)體的實(shí)例。[6]
平均粒徑與Zeta電位檢測脂質(zhì)體理化性質(zhì)評價(jià)通常包括粒徑大小及分布均勻程度、穩(wěn)定性及包封率等方面。粒徑大小及分布除與其包封率及穩(wěn)定性有關(guān)外,同時(shí)對載藥脂質(zhì)體的治療效果有直接的影響。因物理和生理作用,機(jī)體能夠選擇性地在肝、脾、肺、淋巴等部位聚集不同大小的載藥脂質(zhì)體,從而使其釋放藥物發(fā)揮藥效。[7]此外,還可以通過檢測Zeta電位對脂質(zhì)體穩(wěn)定性進(jìn)行評價(jià),Zeta電位越高,體系更加穩(wěn)定。
NICOMP3000系列用于脂質(zhì)體粒徑檢測案例采用GMV(giant multilamellar vesicle):Sugar-doped lipidfilm hydration(脂膜水化反法)方式制備脂質(zhì)體,對過濾 擠出工藝前后樣本脂質(zhì)體用Nicomp 3000設(shè)備進(jìn)行粒度檢 測,測試結(jié)果如表1所示。
表1 GMV法制備脂質(zhì)體過濾前后粒徑分布圖(Gaussian 分布) 由表1可知,沒有過濾擠出前Gaussian分布下平均體積徑為1237nm;經(jīng)過0.4μm、0.2μm、0.1μm過濾器過濾擠出3次后,平均體積徑為219nm、161nm、101nm;平均粒徑明顯降低。其Nicomp 分布如表2所示。通過Nicomp分布可真實(shí)反映脂質(zhì)體粒徑分布情況,由表2中可知,未擠出脂質(zhì)體體積粒徑Nicomp分布有三個(gè)峰;經(jīng)過0.4μm過濾器擠出后三個(gè)峰的粒徑均減小,經(jīng)過0.2μm過濾器過濾之后變?yōu)閱畏?,?jīng)過0.1μm過濾器過濾之后獲得分布更加窄的單峰。
表2 GMV法制備脂質(zhì)體過濾前后粒徑分布圖(Nicomp 分布) 對比Gaussian及Nicomp分布結(jié)果可知:Gaussian分布可整體反應(yīng)脂質(zhì)體粒徑分布情況;而Nicomp分布更真實(shí)反映脂質(zhì)體粒徑分布。通過Nicomp數(shù)據(jù)的分析可以更好的幫助脂質(zhì)體制備工藝的優(yōu)化,選擇合適的處理方式得到想要的粒徑范圍樣本。 尾端大顆粒和小粒子的檢測用作載藥功能的脂質(zhì)體平均粒徑一般為亞微米級別或納米級別,但仍存在微米級別的脂質(zhì)體粒子,尾端大顆粒的存在往往會(huì)吸附小顆粒,影響脂質(zhì)體的穩(wěn)定性,分析尾端大粒子濃度和數(shù)量可以評價(jià)當(dāng)前配方和工藝的情況并做出相應(yīng)優(yōu)化,例如用作佐劑的脂質(zhì)體一般檢測0.8μm~10μm之間的大顆粒分布,以確保工藝的穩(wěn)定。為確保納米藥物的有效性,還需控制小粒子的濃度,過小的脂質(zhì)體粒子容易被腎臟清除到尿液排出,無法起到治療作用。[8]
AccuSizer系列用于脂質(zhì)體粒徑檢測案例 采用GMV(giant multilamellar vesicle):Sugar-doped lipid-film hydration(脂膜水化反法)方式制備脂質(zhì)體,對過濾擠出 工藝前后樣本脂質(zhì)體用AccuSizer A7000設(shè)備進(jìn)行粒度檢測,測試結(jié)果如表3所示。
表3 GMV法制備脂質(zhì)體過濾擠出后粒徑分布圖 由表3可知,上面藍(lán)色譜圖為數(shù)量粒徑分布結(jié)果,下面紅色譜圖為體積粒徑分布測試結(jié)果。分別對制備的脂質(zhì)體樣品用 10μm、5μm、3μm過濾器過濾,經(jīng)過10μm、5μm、3μm過濾器的數(shù)量粒徑分布比未過濾前濃度更低,但數(shù)量粒徑分布 差異不大;觀察體積粒徑分布,可知:經(jīng)過10μm、5μm過濾器過濾后,體積占比中大于等于10μm顆粒明顯減少;經(jīng)過 3μm過濾器過濾后,10μm顆粒體積占比進(jìn)一步減少,且主峰已不在10μm處,尾端大顆粒明顯減少。 穩(wěn)定性分析檢測穩(wěn)定性是評估藥物的常規(guī)項(xiàng),脂質(zhì)體穩(wěn)定性影響存放時(shí)間和有效期,穩(wěn)定性較差的脂質(zhì)體會(huì)導(dǎo)致藥物療效降低或副作用增加,有的藥物甚至產(chǎn)生有毒物質(zhì)??刂莆捕舜罅W訑?shù)量和濃度能有效提高脂質(zhì)體的穩(wěn)定性,此外,粒徑分布較窄的脂質(zhì)體穩(wěn)定性也較好。
過濾粗脂質(zhì)體經(jīng)高壓微射流等設(shè)備整粒之后,需經(jīng)過超濾才能得到最終的脂質(zhì)體成品。超濾是以壓力為推動(dòng)力的膜分離技術(shù)之一,優(yōu)點(diǎn)是沒有相轉(zhuǎn)移,無需添加任何強(qiáng)烈化學(xué)物質(zhì),可以在低溫下操作,過濾速率較快,便于做無菌處理等。超濾技術(shù)的關(guān)鍵是濾膜,濾膜有各種不同的類型和規(guī)格,綜合考量物理攔截,吸附攔截等效果,選擇適配的濾膜材質(zhì)用于過濾。
參考資料: [1] 張燦.聚焦納米治療藥物的成藥性[J].藥學(xué)進(jìn)展,2018,42(11):801-803 [2] 王宇馨. 磷酸錳礦化納米藥物及其抑癌作用研究[D].浙江理工大學(xué),2022. [3] 高諧,丁楊,周建平.脂質(zhì)納米注射劑的研究與應(yīng)用前景[J].中國醫(yī)藥工業(yè)雜志,2019,50(10):1098-1112. [4] 王富喜,鄧宏圖,王濱.靶向脂質(zhì)體的藥理學(xué)評價(jià)[J].現(xiàn)代醫(yī)藥衛(wèi)生,2023,39(01):137-140. [5] 脂質(zhì)體關(guān)鍵工藝之?dāng)D出和超濾 [6] 陳瓊玲,劉紅芝,劉麗,王強(qiáng).高壓微射流法制備白藜蘆醇納米脂質(zhì)體[J].核農(nóng)學(xué)報(bào),2015,29(05):916-924. [7] 王富喜,鄧宏圖,王濱.靶向脂質(zhì)體的藥理學(xué)評價(jià)[J].現(xiàn)代醫(yī)藥衛(wèi)生,2023,39(01):137-140. [8] Fukumura D, Kloepper J, Amoozgar Z, et al. Enhancing cancer immunotherapy using antiangiogenics: opportunities and challenges[J]. Nature Reviews Clinical Oncology, 2018, 15(5):325-340 相關(guān)產(chǎn)品 更多
相關(guān)方案 更多
TN-CMP Slurry粒度檢測——SPOS技術(shù)對比LD技術(shù)
粒度檢測、半導(dǎo)體
2023-11-10
手機(jī)版:
復(fù)雜注射劑之脂質(zhì)體的表征與解決方案
|
虛擬號將在 秒后失效
使用微信掃碼撥號