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1概述

對于某些應(yīng)用場景，只有少量樣品可用于使用多種技術(shù)進(jìn)行分析。在制藥研究中，擁有 1 ml或更少蛋白質(zhì)樣品并需要進(jìn)行多次分析并不罕見。AccuSizer? 能使用小體積測量顆粒大小和濃度，本篇文章將提供AccuSizer用于微量樣品顆粒濃度檢測的實(shí)際案例。

2介紹

單顆粒光學(xué)測量（SPOS）是一種可以提供高準(zhǔn)確性和分辨率的顆粒大小和數(shù)量分析技術(shù)。通過讓懸浮在液體中的顆粒通過LE-400的傳感器，通過光阻擋和光散射的雙重探測器同時得到關(guān)于粒徑大小和顆粒數(shù)量的結(jié)果，通過進(jìn)樣體積得到樣品的顆粒濃度，因此，在測量的過程中樣品的體積必須是確定的。本文通過測量不同體積的樣品，來驗(yàn)證AccuSizer A2000 SIS對于樣品體積，顆粒大小和濃度的準(zhǔn)確性。

3材料和方法

用于進(jìn)行本技術(shù)說明中描述的所有測試的樣品是來自MML公司的 15 μm標(biāo)準(zhǔn)粒子，批號為 NK20C。該標(biāo)準(zhǔn)粒子的濃度為3,118-4,218個/毫升。所有的測量是基于美國PSS粒度儀的AccuSizer  SIS產(chǎn)品，使用LE-400傳感器，校準(zhǔn)和使用的流速為15mL/min。在AccuSizer 780 A2000 SIS安裝一個1mL的注射器型進(jìn)樣器，使用的測量程序如下所述：

• 在測試之前用0.5ml的清洗液進(jìn)行沖洗；

• 所有測試的樣品，都取自相同規(guī)格900μl的標(biāo)準(zhǔn)樣品；

• 在抽取樣品之前的氣隙為0.05mL；

• 每次測量時注射器的凈體積為0.15mL；

測量是在以下樣品體積下進(jìn)行的：650、550、450、350、250、150 和 50 μl。所有測量均進(jìn)行了三次

4結(jié)果

實(shí)驗(yàn)結(jié)果如下圖中的表1和下一頁中的圖1所示。

表1. 650、550、450、350、250、150 和 50 μl實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)

圖1. 樣品體積與顆粒數(shù)線性圖

所有濃度實(shí)驗(yàn)都在顆粒計(jì)數(shù)標(biāo)準(zhǔn)的合格/不合格標(biāo)準(zhǔn)內(nèi)得出結(jié)果。圖 1 中呈現(xiàn)的結(jié)果展示了樣品體積和計(jì)數(shù)之間預(yù)期的、良好相關(guān)的線性關(guān)系。

5結(jié)論

這項(xiàng)研究證明了 AccuSizer SIS 系統(tǒng)即使在低樣品體積下也能生成準(zhǔn)確的大小和計(jì)數(shù)數(shù)據(jù)。雖然數(shù)據(jù)在 50 μL 時仍準(zhǔn)確，我們建議盡可能使用稍大一些的樣品體積，以便降低操作人員的測量難度。