編號：NMJS01544
篇名：殼聚糖納米纖維支架對豬肝細(xì)胞分泌豬內(nèi)源性逆轉(zhuǎn)錄病毒的影響
作者：韓冰； 施曉雷； 肖江強； 張悅； 褚薛慧； 顧勁揚； 顧忠澤； 丁義濤；
關(guān)鍵詞：殼聚糖納米纖維支架； 豬肝細(xì)胞； 豬內(nèi)源性逆轉(zhuǎn)錄病毒； 生物人工肝；
機構(gòu)： 南京大學(xué)醫(yī)學(xué)院附屬鼓樓醫(yī)院肝膽外科； 南京醫(yī)科大學(xué)鼓樓臨床學(xué)院肝膽外科； 東南大學(xué)生物電子學(xué)國家重點實驗室；
摘要： 探討殼聚糖納米纖維支架對肝細(xì)胞的PERV分泌量以及其感染性的影響。將新鮮分離的豬肝細(xì)胞接種于殼聚糖納米纖維支架或普通條件下連續(xù)培養(yǎng)7 d,分為實驗組(Nano組)和對照組(Hep組)。每天收集培養(yǎng)液檢測逆轉(zhuǎn)錄酶(RT)活性,并通過RT-PCR和實時定量PCR測定PERV RNA水平。通過western blot檢測細(xì)胞裂解液中PERV gag 30蛋白含量。細(xì)胞培養(yǎng)液體外孵育HEK293細(xì)胞以測定其感染性。結(jié)果表明:實時定量PCR、RT活性以及western blot具有相似的變化趨勢。在體外培養(yǎng)10 h和2 d出現(xiàn)PERV分泌高峰然后逐漸下降。除第6 dPERV RNA水平和第5 d蛋白水平實驗組明顯高于對照組外,其余均無明顯差異。體外感染實驗無HEK293細(xì)胞感染。殼聚糖納米纖維支架會延長豬肝細(xì)胞的PERV分泌時間但對分泌量以及體外感染性并無明顯影響,可安全用于生物人工肝。
