編號(hào)：NMJS08895
篇名：一鍋法全細(xì)胞催化合成煙酰胺單核苷酸的研究
作者：施玲慧 王宇曉 任宇紅
關(guān)鍵詞： 煙酰胺單核苷酸 全細(xì)胞催化 一鍋法合成 融合表達(dá) 共表達(dá)
機(jī)構(gòu)： 華東理工大學(xué)生物工程學(xué)院
摘要： 對(duì)以腺苷酸(Adenosine monophosphate,AMP)為底物合成β-煙酰胺單核苷酸(β-Nicotinamide mononucleotide,β-NMN)的途徑進(jìn)行了研究。在大腸桿菌(Escherichia coli)BL21(DE3)中構(gòu)建AMP核苷酶(AMN)與磷酸核糖焦磷酸合成酶(PRS)的共表達(dá)及融合表達(dá)體系,其中,融合菌株P(guān)RS-L4-AMN與煙酰胺磷酸核糖轉(zhuǎn)移酶(NAMPT)構(gòu)成的雙菌催化體系具有較高的催化效率,是三菌混合催化體系的2.42倍。進(jìn)一步對(duì)全細(xì)胞催化合成NMN的反應(yīng)體系進(jìn)行優(yōu)化,包括pH、溫度、緩沖液、金屬離子及菌粉投加量等。結(jié)果表明,在優(yōu)化條件下,反應(yīng)2 h時(shí)NMN產(chǎn)量達(dá)到最高,為23.7 mmol/L,總收率達(dá)33.4%,實(shí)現(xiàn)了NMN的一鍋法生物合成。
