編號(hào)：NMJS08653
篇名：低溫沉積3D打印負(fù)載基質(zhì)細(xì)胞衍生因子1的分級(jí)多孔軟骨復(fù)合支架
作者：吳江 殷瀚 嚴(yán)子能 田廣招 丁振罡 袁勛 付力偉 田壯 眭翔 劉舒云 郭全義
關(guān)鍵詞： 細(xì)胞外基質(zhì) 支架 基質(zhì)細(xì)胞衍生因子1 低溫沉積3D打印 軟骨損傷 骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞 遷移
機(jī)構(gòu)： 貴州醫(yī)科大學(xué)附屬醫(yī)院骨科 中國(guó)人民解放軍總醫(yī)院第一醫(yī)學(xué)中心骨科研究所
摘要： 背景:基于原位組織工程再生技術(shù)的飛速發(fā)展,促進(jìn)體內(nèi)干細(xì)胞募集策略為軟骨損傷修復(fù)提供了新的方向。目的:通過(guò)低溫沉積3D打印技術(shù)構(gòu)建負(fù)載基質(zhì)細(xì)胞衍生因子1的分級(jí)多孔細(xì)胞外基質(zhì)支架。方法:采用化學(xué)法制備脫細(xì)胞軟骨細(xì)胞外基質(zhì)。制備脫細(xì)胞軟骨細(xì)胞外基質(zhì)勻漿,并加入基質(zhì)細(xì)胞衍生因子1,作為生物墨水,采用低溫沉積3D打印技術(shù)構(gòu)建分級(jí)多孔細(xì)胞外基質(zhì)支架,通過(guò)大體觀及掃描電鏡觀察支架的微觀結(jié)構(gòu),通過(guò)CCK-8、死活染色及鬼筆環(huán)肽骨架染色評(píng)價(jià)支架的生物相容性,檢測(cè)支架的體外緩釋性能,通過(guò)Transwell實(shí)驗(yàn)檢測(cè)支架對(duì)骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞遷移的影響。結(jié)果與結(jié)論:①掃描電鏡顯示,打印的細(xì)胞外基質(zhì)支架呈現(xiàn)分級(jí)多孔的結(jié)構(gòu),孔徑分布均勻,纖維交錯(cuò)排列,孔與孔之間相互貫通;②CCK-8實(shí)驗(yàn)顯示,細(xì)胞外基質(zhì)支架無(wú)明顯的細(xì)胞毒性;死活染色顯示,骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞能夠很好地在細(xì)胞外基質(zhì)支架上生長(zhǎng);鬼筆環(huán)肽骨架染色顯示,骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞在細(xì)胞外基質(zhì)支架上能夠很好地鋪展開(kāi),呈梭形;③細(xì)胞外基質(zhì)支架具有良好的緩釋性能,在前7 d內(nèi)較快速地釋放基質(zhì)細(xì)胞衍生因子1,累計(jì)釋放率達(dá)約60%,1-4周釋放細(xì)胞因子速度逐漸減緩,4-6周的釋放規(guī)律類似于零級(jí)釋放動(dòng)力學(xué),42 d累計(jì)釋放率約達(dá)80%,并且仍有緩慢釋放的趨勢(shì);④Transwell遷移實(shí)驗(yàn)顯示,基質(zhì)細(xì)胞衍生因子1可提升細(xì)胞外基質(zhì)支架募集干細(xì)胞的能力;⑤結(jié)果表明,基質(zhì)細(xì)胞衍生因子1可提高低溫沉積3D打印細(xì)胞外基質(zhì)支架募集骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞的能力。
