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瑞士步琦
SFC 分離木犀草素
SFC應(yīng)用
1
簡介
紫蘇（Perilla frutescens）是一種草本植物，其葉和種子中含有多種生物活性成分，包括木犀草素（Luteolin），這是一種具有多種藥理作用的黃酮類化合物。木犀草素具有抗氧化、抗炎、抗腫瘤等生物活性。
▲ Luteolin
采用傳統(tǒng)的 Prep HPLC 方式雖然可以將木犀草素從紫蘇提取物中進(jìn)行分離，但是制備時(shí)間較長且流動(dòng)相損耗量較高，無論從時(shí)效性還是經(jīng)濟(jì)效益角度出發(fā)，都不是最佳的選擇。
2
常規(guī)制備色譜洗脫條件
C18, 10x250mm, 15um
梯度洗脫, 水/乙醇 +1% 甲酸
進(jìn)樣量：0.5mL
流速：15mL/min
▲ 木犀草素色譜峰在 36min 之后
除了洗脫時(shí)間較長之外，由于流動(dòng)相中水的存在，也給后續(xù)木犀草素樣品的濃縮帶來一定的麻煩。（即使步琦的旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀能夠解決這一問題）。
3
采用 SFC 樣品純化
那么是否可以采用超臨界流體色譜（SFC）的方式進(jìn)行樣品的純化呢？
首先我們采用 Sepmatix SFC 8X 平行液相色譜快速篩選適合于木犀草素分離的色譜柱。
實(shí)驗(yàn)條件：
流速：3mL/min
運(yùn)行時(shí)間：15min
梯度洗脫 10-60% 甲醇
▲ 紫蘇提取物在 PEI 色譜柱上具有更好的分離效果
之后采用 Prep SFC-50 對(duì)樣品進(jìn)行大量分離與制備。
實(shí)驗(yàn)條件：
PEI, 10x250mm, 5um
梯度洗脫 20-40% 甲醇 5min
進(jìn)樣量：0.3mL
流速：20mL/min
▲ 木犀草素色譜峰在 2min 之后
兩種不同分離方式對(duì)比：
萃取條件 | Prep HPLC | Prep SFC |
木犀草素色譜峰 | 36min 之后 | 2min 之后 |
總運(yùn)行時(shí)長 | 42 min + 15 min平衡 | 8 min + 1 min 平衡 |
總?cè)軇┦褂?/p> | 390ml ethanol + 240ml water | 50 ml methanol |
4
實(shí)驗(yàn)結(jié)論
通過對(duì)比發(fā)現(xiàn)，SFC 在分離木犀草素的過程中，無論從時(shí)效性還是溶劑消耗量上都優(yōu)勢明顯。
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