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高效提純新冠病毒，貝克曼離心機是如何做到的？

貝克曼庫爾特生命科學 2020-05-26 | 閱讀：8626

貝克曼離心機—您實驗室中的病毒分離專家

高效分離純化病毒樣品是病毒學研究以及抗病毒藥物篩選、疫苗研制的基礎。自19世紀60年代以來，貝克曼超速離心機一直致力于病毒分離研究，已成功幫助科學家分離得到幾乎所有病毒種類。作為當之無愧的病毒分離專家，貝克曼Optima X系列超速離心機以其安全可靠、操作方便的卓越性能贏得了科學家的青睞，成為病毒分離的最佳之選。

新冠肺炎疫情以來，新病例迅速增加，在世界范圍內(nèi)引起大規(guī)模爆發(fā)，并導致了相當高的發(fā)病率和死亡率?？茖W家已鑒定其病原體為SARS-CoV-2，2020年3月11日，WHO將COVID-19列為大流行病。在病毒研究與藥物篩選、疫苗研發(fā)中新冠病毒的分離純化是必不可少的重要步驟，利用超速離心技術高效分離病毒的方法已被國內(nèi)外專家廣泛認可，成為病毒分離的主要方法。

超速離心機分離病毒

中國醫(yī)學科學院與北京協(xié)和醫(yī)學院的研究團隊通過質粒轉染構建了SARS-CoV-2 S蛋白假病毒系統(tǒng)，證明人類ACE2（血管緊張素轉化酶2）是SARE-CoV-2病毒的功能受體，同時他們對SARS-CoV-2的易感細胞系、病毒受體、侵入途徑等進行了研究，揭示了病毒侵入人體細胞的具體過程，這一研究已發(fā)表在《Nature Communication》雜志。

在研究中，為了檢測假病毒系統(tǒng)SARS-CoV-2 S蛋白的表達，他們首先需要將假病毒顆粒從細胞裂解后的上清液中分離出來。在分離過程中，他們使用Beckman超速離心機，將病毒上清加入SW41水平轉子的離心管中，并在離心管底部加入20%的蔗糖墊液，然后在4℃環(huán)境下以25,000rpm的轉速離心2h。離心完畢后棄去上清，留下管底沉淀，并用30 μl緩沖液重懸，得到SARS-CoV-2假病毒樣品用于后續(xù)檢測。

在超速離心分離病毒時，為了保持病毒顆粒的完整性與病毒形態(tài)，經(jīng)常使用墊液沉淀，例如在管底加入20%的蔗糖墊液，使顆粒到達管底時減速沉降，最大程度保持病毒顆?；钚耘c完整度。

超速離心機助力新冠病毒提取

武漢病毒研究所的石正麗研究員在2013年發(fā)表于國際頂尖雜志《Nature》的一篇研究中提到，他們從蝙蝠糞便樣品中分離到一株活體的SL-CoV冠狀病毒。在進行毒株提取與分離時，石正麗研究團隊收集細胞培養(yǎng)上清液后，使用Beckman超速離心機Type 90 Ti定角轉頭，加入20%的蔗糖墊液80,000×g離心90分鐘，對收集到的病毒顆粒進行分離與濃縮。PBS重懸后染色，進行透射電鏡的觀察。

分離SARS-Cov-2假病毒樣品

在新華醫(yī)院與杭州BaylorOracle公司合作對于SARS-Cov-2的抗病毒藥物篩選研究中，他們通過體外構建SARS-Cov-2假病毒，研究發(fā)現(xiàn)吲哚美辛（indomethacin）是一種有效的SARS-Cov-2抑制劑。在分離SARS-Cov-2假病毒樣品時，他們同樣使用20%蔗糖墊液，50,000×g超速離心90分鐘后，用PBS重懸得到病毒樣品，并用于細胞感染。

更高純度病毒樣本提取

在病毒研究中，當使用電鏡等方法觀察病毒形態(tài)時，對病毒顆粒的純度要求較高，僅使用差速離心法，如前文介紹的蔗糖墊超速離心，并不得到高純度的病毒樣品。因此通常使用密度梯度離心與蔗糖墊超速離心結合的實驗方法來獲得滿足要求的高純度、高濃度的病毒顆粒。

加拿大公共衛(wèi)生局的研究人員在使用冷凍電子顯微鏡研究SARS-CoV冠狀病毒與ACE2結合時的構象變化時，詳細描述了他們?nèi)绾问褂肂eckman的超速離心機進行病毒分離純化的。收集上清后，他們首先使用Beckman SW32水平轉頭28,000rpm離心90分鐘，PBS重懸后得到SARS-CoV病毒樣品粗提產(chǎn)物。然后將病毒樣品置于12-30%的碘克沙醇梯度液中，使用SW40轉頭，38,000 rpm離心2.5小時，然后收集高純度的病毒樣品用于電鏡檢測。

總而言之，貝克曼作為離心技術領域的專家，使用貝克曼超速離心機分離純化病毒已得到科學家的廣泛認可，具有龐大的用戶群體與文獻支持，是您進行病毒研究的可靠選擇。

為了幫助研究人員高效分離病毒毒株與假病毒，病毒分離專家貝克曼庫爾特推出病毒純化專用的超離配置方案，致力于幫助客戶解決病毒分離難題。

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自1947年第一臺商用超速離心機發(fā)明以來，貝克曼庫爾特離心技術已有70多年的歷史。早在19世紀60年代，已有許多用戶使用貝克曼離心機成功分離了多種病毒顆粒。截至現(xiàn)在，貝克曼超離已幫助客戶分離純化得到流感病毒、肝炎病毒、腺病毒、慢病毒等多種幾乎覆蓋所有類型的病毒樣品。貝克曼龐大的用戶群體已為研究人員儲存發(fā)表了數(shù)以萬計的病毒分離方法與文獻，助力病毒研究的同時，也使貝克曼離心機成為了當之無愧的病毒分離專家。