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這是全球**款專業(yè)做浮游植物研究的流式細(xì)胞儀,可對大小在0.4 mm-4 mm的浮游植物進(jìn)行分析。儀器整合式設(shè)計(jì),結(jié)構(gòu)堅(jiān)固,適合野外使用,且儀器移動(dòng)后無需另外校準(zhǔn)。 1) 可在室內(nèi)或調(diào)查船上使用 2) 防濺水設(shè)計(jì) 3) 可升級(jí)為CytoSub和CytoBuoy 4) 特殊版本CytoSense GV可直接測量帶氣囊的浮游植物(如微囊藻) |
工作原理細(xì)胞/顆粒流過流動(dòng)池(1)的檢測區(qū)域時(shí),被激光照射(2)。樣品被中空針管(3)注入錐狀注射器(4)中,被不含任何顆粒的鞘液(樣品的濾液,由儀器自動(dòng)過濾提供)(5)包裹著流過1000 mm2石英毛細(xì)管。鞘液包繞著樣品高速流動(dòng),組成一個(gè)圓形的流束,待測細(xì)胞在鞘液的包被下單行排列(6),依次通過檢測區(qū)域。這個(gè)過程中,顆粒(7)間的距離被拉開,當(dāng)顆粒被與之呈90度角的激光束(2)照射(8)時(shí),顆粒的散射光和熒光會(huì)被檢測系統(tǒng)(9)檢測。入射到檢測系統(tǒng)的光束(10)被收集物鏡(12)、光譜反射鏡(13)處理后被檢測器(11)檢測。 |
流動(dòng)單元
鞘液的供給量由泵精確控制。特制的鞘液入口大大降低了鞘液的剪切力,有助于保持脆弱細(xì)胞(或群體)的完整性。特制的兩步注入系統(tǒng)有效防止了由于船或浮標(biāo)的波動(dòng)引起的樣品流偏移,同時(shí)也為空氣留了一個(gè)通路。鞘液系統(tǒng)是一個(gè)自我循環(huán)系統(tǒng),不需額外添加,不需廢液收集瓶。過濾生產(chǎn)鞘液的濾膜可以持續(xù)工作數(shù)月。特制齒輪泵用于為過濾鞘液施加壓力。 |
CytoSense GV型——可分析帶氣囊的浮游植物
有些浮游植物(如微囊藻)帶有氣囊。氣囊會(huì)改變光散射,從而會(huì)改變這類浮游植物的“光學(xué)指紋”。通過施加瞬間高壓可以打破氣囊,從而消除由于氣囊引起的光散射變化,修復(fù)“光學(xué)指紋”。通過兩次測量可以方便的區(qū)分出帶氣囊的種:**次直接測量,第二次施加高壓破壞氣囊后測量。那些在施加高壓后改變了光散射的種就是帶氣囊的種。
CytoSense的特殊版本——CytoSense GV型可以滿足上述要求。CytoSense GV型就是在CytoSense的基礎(chǔ)上增加一個(gè)高壓模塊。這個(gè)高壓模塊可以提供瞬間高壓用于破壞氣囊。這個(gè)過程可以由軟件自動(dòng)完成。
CytoSense應(yīng)用于高濁度水體的對策
針對我國很多水體濁度高、泥沙含量高的特點(diǎn),根據(jù)國內(nèi)用戶需求,澤泉科技有限公司與荷蘭CytoBuoy公司合作提出如下解決方案:
1)進(jìn)樣篩選 水樣被進(jìn)樣器采集后,在進(jìn)樣器內(nèi)部經(jīng)過篩選排除空氣和砂粒(圖1)。進(jìn)樣器內(nèi)部設(shè)計(jì)非常獨(dú)特,從上到下有三個(gè)出水口,其中上邊的出水口用于排除空氣,多數(shù)砂粒由于沉降速率較大會(huì)經(jīng)下部出水口排除,只有中間的出水口用于采集浮游植物、浮游動(dòng)物和與它們密度相差不大的砂粒進(jìn)行流式細(xì)胞計(jì)數(shù)和其它分析。
如果水中砂粒粒徑很大,可以在進(jìn)樣器中增加一個(gè)不銹鋼篩網(wǎng),用于濾除粒徑大于1 mm的泥沙顆粒。
對于多數(shù)粒徑大于50-100 um的砂粒而言,它們的沉降速率大于CytoSense的進(jìn)樣流速(1-2 cm/s),因此不會(huì)被進(jìn)樣器吸入。
2)外置鞘液系統(tǒng)
CytoBuoy系列浮游植物流式細(xì)胞儀(包括CytoSense、CytoBuoy和CytoSub)的一個(gè)重大創(chuàng)新就是不用外加鞘液,而是直接采用水樣的過濾液作為鞘液,這樣既節(jié)省了用戶的成本,也省去了更換鞘液的麻煩,同時(shí)還避免了流路發(fā)生生物污染的可能。但是由于樣品過濾生成的鞘液量不是很大,在測量高濁度水體樣品時(shí),就難于避免水體中黃色物質(zhì)發(fā)出的熒光的影響。另外,對于類似我國黃河水體、或者洪水期的長江水體而言,泥沙顆粒非常多,可能每100個(gè)顆粒中只有1-5個(gè)浮游植物細(xì)胞(甚至有可能每1000個(gè)顆粒中只有1個(gè)浮游植物細(xì)胞),其它都是泥沙顆粒,這極大增加了浮游植物計(jì)數(shù)的難度。但即使是這樣的水樣,CytoSense也是可以測量的。為了達(dá)到更好的分析效果,建議采用如下的外置鞘液系統(tǒng)。
外置鞘液系統(tǒng)的鞘液采用蒸餾水或市場上購買的桶裝水皆可。自來水由于含氯,對浮游植物活性有影響,因此不建議使用。其它類似PBS緩沖液等也可作為鞘液,只是比蒸餾水或桶裝水的獲取更麻煩,成本更高。鞘液桶采用容量20-30升的塑料桶即可。根據(jù)工作模式,可分為外置非循環(huán)鞘液系統(tǒng)和外置循環(huán)鞘液系統(tǒng)。
外置非循環(huán)鞘液系統(tǒng)(圖2):鞘液一次性使用,用完即排出不在使用。連續(xù)工作1小時(shí)約需5升鞘液,工作1天約需50升鞘液。
外置循環(huán)鞘液系統(tǒng)(圖3):鞘液使用后經(jīng)循環(huán)過濾系統(tǒng)可重復(fù)利用,大大節(jié)省了鞘液用量。由于循環(huán)使用鞘液,水體樣品中的黃色物質(zhì)會(huì)流入鞘液中,盡管被稀釋,但還是會(huì)產(chǎn)生微弱的熒光。因此建議鞘液桶足夠多(20-30升),以盡量降低黃色物質(zhì)熒光引起的誤差。同時(shí)建議每天更換新的鞘液。
通過以上這些設(shè)計(jì),CytoSense完全可以直接測量高濁度水體樣品(如洪水期的長江水樣、長江口水樣),可以對水中總顆粒進(jìn)行計(jì)數(shù)。通過樣品是否發(fā)出熒光,可以區(qū)分浮游植物和其它顆粒。通過多色熒光,可以對浮游植物進(jìn)行聚類分析。通過浮游植物專家?guī)?,可以對多?shù)非球狀西部鑒定到種。當(dāng)然,如果結(jié)合GV模塊(自動(dòng)破碎微囊藻的囊),還可以對微囊藻(不需預(yù)處理)直接測量。
暫無數(shù)據(jù)!