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Biolistic PDS-1000/He 基因槍系統(tǒng)將微米大小的、包被有核酸的金或鴿微粒(0.6-1.6 μm )加速到所需要的速度,從而將基因?qū)爰?xì)胞、組織或器官。系統(tǒng)利用高壓氨氣的轟擊,來推動(dòng)攜帶有微粒的塑料大顆粒載體盤朝目標(biāo)細(xì)胞方向加速。推進(jìn)大顆粒載體的氨氣壓力由所使用的不同破裂盤決定。破裂盤是一種可在特定壓力下破裂的塑料密封體。終止屏可阻止大顆粒載體,但微粒可以通過從而進(jìn)入靶細(xì)胞。為了提高這一進(jìn)程的效率,可抽空轉(zhuǎn)化室,使壓力低于大氣壓力,從而當(dāng)微粒進(jìn)入靶細(xì)胞時(shí)可減少其摩擦阻力。
1、一種可重復(fù)的、轉(zhuǎn)化完整培養(yǎng)細(xì)胞的方法,幾乎無(wú)需對(duì)細(xì)胞進(jìn)行處理
2、可以避免使用傳統(tǒng)轉(zhuǎn)染方法時(shí)化學(xué)試劑對(duì)靶細(xì)胞的毒性作用
3、實(shí)驗(yàn)過程的**控制
4、高重復(fù)性
PDS-1000/He 基因槍系統(tǒng)加上Hepta 適配器后,可以比標(biāo)準(zhǔn)系統(tǒng)多轉(zhuǎn)化7-10 倍的細(xì)胞。它配接PDS-1 000/He 系統(tǒng)的沖擊室,將氯氣沖擊波分導(dǎo)至7 個(gè)載體盤處。這樣,通過在更大面積上均一地分散DNA 包被的金粉或鴿粉,增加了這個(gè)系統(tǒng)一次轟擊的細(xì)胞數(shù)。當(dāng)氨氣被分成7 道時(shí),降低了壓力和顆粒速度,該系統(tǒng)特別適合不太需要強(qiáng)大穿透力的植物和培養(yǎng)細(xì)胞。
轟擊參數(shù)* | ||||
細(xì)胞類型 | 真空("Hg) | 目標(biāo)間距(cm) | 氯氣壓力(psi) | 金屬微粒大小 |
細(xì)菌 | 29 | 6 | 1,100 | M-5 鴿粉 |
酵母菌 | 28 | 6 | 1,300 | 0.6 μm 金粉 |
藻類 | 29 | 6 | 1,300 | 0.6 μm 金粉 |
植物 胚芽 | 28 | 6 | 1,300 | 1.0 μm 金粉 |
愈傷組織 | 28 | 9 | 1,100 | 1.0 μm 金粉 |
細(xì)胞器 | 28 | 6 | 1,300 | 0.6 μm 金粉 |
動(dòng)物 | ||||
組織培養(yǎng) | 15 | 3 | 1,100 | 1.6 μm 金粉 |
組織切片 | 25 | 9 | 1,100 | 1.6 μm 金粉 |
暫無(wú)數(shù)據(jù)!