編號：NMJS08797
篇名：破壁方法對紅球菌11-3胞內(nèi)幾丁質(zhì)脫乙酰酶釋放的影響
作者：肖宇 石文琪 于宏偉 馬愛進(jìn) 桑亞新 孫紀(jì)錄
關(guān)鍵詞： 破壁方法 紅球菌 幾丁質(zhì)脫乙酰酶 液氮研磨 勻漿
機(jī)構(gòu)： 河北農(nóng)業(yè)大學(xué)食品科技學(xué)院
摘要： 紅球菌11-3是一株高產(chǎn)幾丁質(zhì)脫乙酰酶(CDA)的菌株,幾丁質(zhì)在該酶的催化作用下可轉(zhuǎn)化為殼聚糖,該酶在殼聚糖的生產(chǎn)中具有重要作用。紅球菌11-3菌株所產(chǎn)CDA為胞內(nèi)酶,成為催化反應(yīng)的一大障礙。為了提高CDA的釋放率,本研究首先利用不同的物理方法(反復(fù)凍融、超聲、球磨、勻漿和液氮研磨)、化學(xué)方法(表面活性劑處理、氯仿處理)和生物學(xué)方法(溶菌酶處理)對紅球菌11-3進(jìn)行破壁處理,測定CDA酶活力和釋放率,并通過掃描電子顯微鏡觀察細(xì)胞形態(tài)變化。結(jié)果表明,不同方法的破壁效果存在很大差異,其中,液氮研磨法破壁效果最佳,菌體表面出現(xiàn)細(xì)密的孔洞,CDA釋放率為45.13%,總酶活力損失率為2.03%;勻漿處理法次之,CDA釋放率為16.00%,總酶活力損失率為9.18%。利用勻漿和液氮研磨聯(lián)合處理紅球菌11-3細(xì)胞,細(xì)胞表面產(chǎn)生更多、更大的孔洞,CDA釋放率高達(dá)86.17%,總酶活力損失率為9.11%,上清液中CDA酶活力為480.2 U/mL,較液氮研磨法相比提高了1.48倍。結(jié)論:勻漿和液氮研磨聯(lián)合處理可有效破壞紅球菌11-3細(xì)胞壁,提高胞內(nèi)CDA釋放效率。本研究結(jié)果對紅球菌11-3內(nèi)CDA應(yīng)用于殼聚糖的生產(chǎn)具有參考作用。
