編號(hào)：CPJS06830
篇名：氧化石墨烯基質(zhì)毛細(xì)管電色譜胰蛋白酶微反應(yīng)器的性能研究
作者：劉佳 董旭 郭華 王嫚 申剛義
關(guān)鍵詞： 酶微反應(yīng)器 氧化石墨烯 毛細(xì)管電色譜 胰蛋白酶 抑制劑
機(jī)構(gòu)： 中央民族大學(xué)藥學(xué)院
摘要： 基于石墨烯優(yōu)良的物化性能,利用層層組裝法將氧化石墨烯修飾于石英毛細(xì)管內(nèi)壁,制備了氧化石墨烯基質(zhì)的毛細(xì)管電色譜,通過(guò)電滲流、拉曼光譜等對(duì)其進(jìn)行表征。在此基礎(chǔ)上,基于離子鍵合法將胰蛋白酶固定于毛細(xì)管電色譜柱頭,制備胰蛋白酶微反應(yīng)器。兩者結(jié)合構(gòu)成毛細(xì)管電色譜胰蛋白酶微反應(yīng)器。實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示,氧化石墨烯作為基質(zhì)既可提高樣品的分離效率,還能促進(jìn)胰蛋白酶的催化性能。氧化石墨烯修飾的毛細(xì)管電色譜對(duì)N-苯甲酰-L-精氨酸乙酯鹽酸鹽(BAEE)和N-苯甲酰-L-精氨酸(BA)混合物的分離度從裸毛細(xì)管的3.70提升至4.71,而其固定化酶活性(米氏常數(shù)Km=1.10mmol/L,最大反應(yīng)速率Vmax=0.32mmol·L^-1·s^-1)也明顯優(yōu)于裸毛細(xì)管(Km=109.77mmol/L,Vmax=0.00046mmol·L^-1·s^-1)。利用所制備的微反應(yīng)器從10種中藥材中篩選胰蛋白酶抑制劑活性成分的藥材,結(jié)果發(fā)現(xiàn)三七和大黃中均存在胰蛋白酶抑制劑活性成分。
