編號：CPJS05279
篇名：納米氧化鋅致細(xì)胞凋亡的機制研究
作者：楊通旺 ;張博聞 ;吳濤 ;吳剛
關(guān)鍵詞：靶向運輸 納米粒子 氧化應(yīng)激 凋亡 自噬
機構(gòu)： 包頭醫(yī)學(xué)院研究生學(xué)院,內(nèi)蒙古包頭014040
摘要： 目的研究氧化應(yīng)激在納米氧化鋅引起的人非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞（H1299）細(xì)胞自噬和凋亡之間的作用。方法實驗分為實驗組和對照組,對照組給予正常的培養(yǎng)基而實驗組在培養(yǎng)基中分別給予2.5、10和25μg/ml（低,中,高劑量組）濃度的納米氧化鋅。向細(xì)胞中轉(zhuǎn)染綠色熒光蛋白-微管相關(guān)蛋白1輕鏈3（GFP-LC3）質(zhì)粒,通過觀察綠色熒光斑點確定自噬的發(fā)生。Western blotting檢測LC3-Ⅱ來驗證綠色熒光斑點確定的細(xì)胞自噬。鈣黃綠素乙酰甲酯（calcein AM）和碘化丙啶（PI）染色來確定活細(xì)胞和晚期凋亡細(xì)胞。超氧化物陰離子熒光探針（DHE）染色檢測細(xì)胞內(nèi)活性氧（ROS）的聚集。應(yīng)用動態(tài)光散射測定納米氧化鋅在培養(yǎng)基中的分散狀態(tài)。結(jié)果對照組細(xì)胞有少量的DHE被氧化成紅色,也出現(xiàn)了綠色熒光斑點的聚集,但沒有細(xì)胞被PI染成紅色。低劑量組被氧化的DHE開始增多,綠色熒光斑點開始增多,少量細(xì)胞被PI染成紅色;中、高劑量組中大量DHE被氧化,綠色熒光斑點顯著增多,大量細(xì)胞被PI染成紅色。實驗組納米氧化鋅在培養(yǎng)基中分散良好。結(jié)論納米氧化鋅在H1299細(xì)胞中引起了氧化應(yīng)激,氧化應(yīng)激誘發(fā)了細(xì)胞的自噬,細(xì)胞自噬功能的紊亂誘導(dǎo)了細(xì)胞的凋亡。
