編號(hào)：NMJS05755
篇名：多重PCR結(jié)合核酸侵入反應(yīng)及納米金顯色技術(shù)檢測(cè)呼吸道病原體
作者：樊歡 ;戚宇華 ;朱政 ;葛以躍 ;崔侖標(biāo) ;吳濤 ;史智揚(yáng)
關(guān)鍵詞：呼吸道病原體 多重PCR 侵入反應(yīng) 納米金顯色
機(jī)構(gòu)： 江蘇省疾病預(yù)防控制中心病原微生物研究所衛(wèi)生部腸道病原微生物重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室,南京210009
摘要： 目的 建立一種呼吸道病原體多重PCR結(jié)合核酸侵入反應(yīng)及納米金顯色的檢測(cè)方法.方法 針對(duì)幾種重要的呼吸道病原體（甲型流感病毒、乙型流感病毒、SARS冠狀病毒、嗜肺軍團(tuán)菌、腦膜炎奈瑟菌以及腺病毒）保守區(qū)基因設(shè)計(jì)引物,進(jìn)行多重PCR反應(yīng)、核酸侵入反應(yīng)及納米金顯色反應(yīng),對(duì)多種呼吸道病原體同時(shí)進(jìn)行檢測(cè),以人偏肺病毒、呼吸道合胞病毒、人鼻病毒、肺炎鏈球菌4種呼吸道病原核酸評(píng)價(jià)其檢測(cè)特異性,以體外轉(zhuǎn)錄的病毒RNA或擴(kuò)增的PCR片段評(píng)價(jià)其檢測(cè)敏感性.結(jié)果 成功建立了一種呼吸道病原體多重PCR結(jié)合核酸侵入反應(yīng)及納米金顯色的檢測(cè)技術(shù).建立的檢測(cè)方法可特異的檢測(cè)目的病原體,且與人偏肺病毒、呼吸道合胞病毒、人鼻病毒、肺炎鏈球菌無(wú)交叉反應(yīng).該方法對(duì)不同靶標(biāo)的檢測(cè)靈敏度介0.5 ～50拷貝/μL.結(jié)論 建立的呼吸道病原體多重PCR結(jié)合核酸侵入反應(yīng)及納米金顯色技術(shù)的檢測(cè)方法,具有較高的檢測(cè)特異性及靈敏度,檢測(cè)通量高,肉眼即可觀察結(jié)果,在傳染病病原體檢測(cè)方面具有廣闊的應(yīng)用前景.
