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        Biochrom30+ 氨基酸分析儀檢測褐籃子魚中水解氨基酸

        Biochrom30+ 氨基酸分析儀檢測褐籃子魚中水解氨基酸
        麥奇克/Microtrac  2021-01-13  |  閱讀:1418

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        摘要:

        以褐籃子魚為原料,使用Biochrom30+全自動氨基酸自動分析儀對其肌肉的氨基酸組成進(jìn)行分析。結(jié)果表明褐籃子魚肌肉中氨基酸總量的質(zhì)量百分比為17770.7mg/100g,必需氨基酸(不含色氨酸)占氨基酸總量的39.37%,鮮味氨基酸占氨基酸總量的39.27%。

         

        一、樣品前處理

        1、所用試劑

        1.1  濃鹽酸,濃度≥36%,優(yōu)級純

        1.2  6mol/L 鹽酸:取500mL 鹽酸加水稀釋至1000mL,混勻。

        1.3  水:去離子水

        1.4  苯酚:須重蒸

        1.5  17種氨基酸標(biāo)準(zhǔn)品

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        2、前處理設(shè)備

        1)  析天平:感量分別為 0.0001g和0.00001g。

        2)  水解管:耐壓螺蓋玻璃試管,體積為25mL

        3)  勻漿機(jī)。

        4)  無油真空泵

        5)  干浴水解濃縮儀

        6)  移液管

        7)  0.22um濾膜


        3、樣品制備(參考國標(biāo)GB 5009.124-2016)

        原料魚手工去除魚鱗、魚皮、魚刺和內(nèi)臟,采肉后清洗、瀝干,在勻漿機(jī)中打成肉糜,于-18℃冰箱中冷凍保存,分析時取出解凍后使用。


        4、試樣水解

        稱取含蛋白7.5-25mg的試樣,加入水解管中,加入15mL 6mol/L鹽酸,繼續(xù)向水解管內(nèi)加入苯酚3滴~4滴。冷凍3min~5min,接到真空泵的抽氣管上,抽真空(接近0Pa),然后充入氮?dú)?重復(fù)抽真空-充入氮?dú)?次后,在充氮?dú)鉅顟B(tài)下擰緊螺蓋。將水解管放入干浴水解濃縮儀中,110°C水解22-24h,冷卻、混勻、開管、轉(zhuǎn)移并定容到50ml容量瓶中,用移液管取適量樣液,在干浴水解濃縮儀中50°C吹干,必要時加入少許水,重復(fù)吹干1-2次,加入3-5mL PH2.2的稀釋上機(jī)用檸檬酸鈉緩沖液溶解,振蕩混勻后,吸取溶液通過0.22μm 濾膜后,轉(zhuǎn)移至儀器進(jìn)樣瓶,為樣品測定液,供儀器測定用。


        二、分析方法描述(Biochrom 30+)

        氨基酸分析儀分析方法參數(shù):

        1) 色譜柱:Biochrom Na型陽離子交換樹脂柱,4.6x20cm

        2) 分離程序:

        20210113-1392587850.png

        3)  運(yùn)行時間:經(jīng)分析時間+再生時間 57min

        4)  反應(yīng)單元溫度:135°C。

        5)  檢測波長:570nm、440nm同時檢測。


        三、樣品中氨基酸含量的計算

        樣品測定液氨基酸的含量按式(2)計算:

        ci = cs /As ×Ai ……………………(2)式中:

        ci ———樣品測定液氨基酸i的含量,單位為納摩爾每毫升(nmol/mL);

        Ai ———試樣測定液氨基酸i的峰面積;

        As ———氨基酸標(biāo)準(zhǔn)工作液氨基酸s的峰面積;

        cs ———氨基酸標(biāo)準(zhǔn)工作液氨基酸s的含量,單位為納摩爾每毫升(nmol/mL)。


        試樣中各氨基酸的含量按式(3)計算:

        Xi = (ci ×F ×V ×M)/ (m ×109) ×100 …………(3)式中:

        Xi ———試樣中氨基酸i的含量,單位為克每百克(g/100g);

        ci ———試樣測定液中氨基酸i的含量,單位為納摩爾每毫升(nmol/mL);

        F ———稀釋倍數(shù);

        V ———試樣水解液轉(zhuǎn)移定容的體積,單位為毫升(mL);

        M ———氨基酸i的摩爾質(zhì)量,單位為克每摩爾(g/mol);

        m ———稱樣量,單位為克(g);

        109 ———將試樣含量由納克(ng)折算成克(g)的系數(shù);

        100 ———換算系數(shù)。


        附、褐籃子魚分析圖譜及做樣結(jié)果

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        全自動氨基酸分析儀

         

        由具有50年專業(yè)氨基酸分析制造經(jīng)驗(yàn)的Biochrom公司生產(chǎn)。能夠出具無爭議的國際和國家標(biāo)準(zhǔn)的檢測報告,為您帶來準(zhǔn)確的分析結(jié)果以及和歐美接軌的技術(shù)服務(wù)的儀器。

         

         

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