貝克曼庫爾特商貿(mào)(中國)有限公司
已認(rèn)證
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基因編輯技術(shù)是指能夠?qū)δ繕?biāo)基因進行定點“編輯”,例如片段插入、缺失,堿基定點編輯等,實現(xiàn)對特定DNA片段的修飾。
基因編輯工具
目前的基因編輯工具主要有鋅指核酸酶(ZFN)、轉(zhuǎn)錄因子激活樣效應(yīng)物核酸酶(TALEN)和規(guī)律間隔成簇短回文重復(fù)序列(CRISPR/Cas)等技術(shù)。CRISPR/Cas系統(tǒng)由于其精準(zhǔn)、簡單、快速、成本低的特點,成為目前基因編輯使用最為廣泛的技術(shù)。
以CRISPR系統(tǒng)為例,在使用CRISPR/Cas系統(tǒng)進行基因編輯過程中,需要gRNA來引導(dǎo)Cas蛋白對基因組進行切割,然后再通過供體兩端的同源片段進行同源重組,或利用生物體自身的非同源末端連接進行修復(fù)。
CRISPR/CAS基因編輯技術(shù)
基因編輯流程
無論使用哪種工具進行基因編輯,都需要構(gòu)建載體,將基因編輯工具導(dǎo)入到細胞中,然后對細胞進行驗證,篩選出被正確編輯的細胞。
以酵母細胞基因編輯為例:
構(gòu)建載體過程包含了基因合成或擴增、基因組裝、質(zhì)粒轉(zhuǎn)化、大腸桿菌培養(yǎng)、質(zhì)粒驗證、測序等步驟。然后將構(gòu)建好的載體轉(zhuǎn)入酵母細胞中,其中包含酵母轉(zhuǎn)化、培養(yǎng)、克隆驗證等步驟。
基因編輯流程長、步驟多、需要熟練的操作,耗費了科研工作者大量的時間和精力,往往是抬頭看文獻、低頭做實驗,實驗虐我千百遍,我待實驗如初戀。
如果可以將基因編輯使用的質(zhì)粒像工業(yè)化生產(chǎn)線上的產(chǎn)品一樣自動化生產(chǎn),輸入不同的基因片段,產(chǎn)出相應(yīng)的質(zhì)粒,然后再將其轉(zhuǎn)入宿主細胞中進行基因編輯,將極大的提高科研以及研發(fā)效率,并且可以使科研人員從實驗中解放出來,專注于實驗的設(shè)計和數(shù)據(jù)分析。
自動化基因編輯
基因編輯自動化流水線需要完成基因擴增、組裝、大腸桿菌轉(zhuǎn)化、克隆驗證、質(zhì)粒提取、質(zhì)粒轉(zhuǎn)染、宿主驗證等多種實驗操作,其中涉及多種儀器設(shè)備,如自動化液體工作站、酶標(biāo)儀、克隆挑選機器人、培養(yǎng)箱、PCR儀、離心機、封膜機、撕膜機等。同時,需要一款強大的整合軟件,進行儀器調(diào)度、資源分配、耗材統(tǒng)籌、數(shù)據(jù)管理,使實驗過程更加的流暢。
Beckman Coulter自1986年生產(chǎn)第一臺Biomek 1000自動化液體工作站開始,至今已有30余年時間,期間不斷開發(fā)、創(chuàng)新,提升產(chǎn)品力,并擁有專業(yè)的整合部門,為客戶提供個性化的整合方案。
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基因編輯自動化系統(tǒng)示例
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