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【設備更新系列】等溫滴定量熱儀（ITC）篇

馬爾文帕納科 2024-08-15 | 閱讀：1012

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大規(guī)模設備更新的方案正在穩(wěn)步推行中，您的實驗室是否考慮新增或更新一臺分子互作分析儀器？

被數(shù)萬篇科學論文的引用的等溫滴定微量熱儀，被業(yè)內(nèi)公認為分子間相互作用分析的金標準技術，可以用來交叉驗證多種基于表面的生物長安其互作技術和熒光互作技術。這里為您簡單介紹一下ITC的主要應用，供您參考。

典型應用

藥物設計-先導化合物優(yōu)化

結(jié)合虛擬分子模擬和晶體結(jié)構(gòu)數(shù)據(jù)，ITC技術可以幫助開發(fā)者設計和優(yōu)化出既具有較高特異性(焓變貢獻為主)、且具有較好的透膜性 (熵變貢獻為主) 的藥物分子 (熵焓平衡設計) 。

圖1：HIV-蛋白酶抑制劑的研發(fā)過程

圖2：第二代他汀類藥物（Statins）

篩選和交互驗證結(jié)合特異性

表觀遺傳學中的組蛋白marker研究，通過ITC實驗，用具有不同甲基化修飾以及序列的組蛋白肽段marker (下圖中由左向右依次為: H3K4me3, H3C4me3和H3G4）滴定蛋白TAF3 PHD結(jié)構(gòu)域，從而確認特異性結(jié)合的組蛋白marker。

圖3：由左向右依次為: H3K4me3, H3C4me3和H3G4

酶學動力學研究

Microcal ITC可以在無需對底物或產(chǎn)品進行任何修飾的情況下完成酶促動力學的研究，獲取Km, kcat和Ki等數(shù)據(jù)。采用ITC和分光光度計進行酶促動力學(PNPP-PP1-γ)的研究的對比。使用兩種不同技術獲得的酶促動力學速率參數(shù)吻合非常好。

圖4：不同技術獲得的酶促動力學速率參數(shù)吻合

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