中國粉體網(wǎng)訊 使用高壓均質(zhì)機(jī) (HPH) 制備的聚合物納米顆粒在生產(chǎn)過程中提出了一些獨(dú)特的挑戰(zhàn)，通過應(yīng)用質(zhì)量源于設(shè)計(jì) (QbD) 方法可以更好地理解這些挑戰(zhàn)。本文將重點(diǎn)介紹識別關(guān)鍵材料屬性的方法，包括抗腫瘤藥物、聚合物、表面活性劑、溶劑系統(tǒng)和分散系統(tǒng)。全面了解 HPH 工作期間的壓力和循環(huán)次數(shù)等關(guān)鍵工藝參數(shù)，并提出尺寸、形狀、表面電荷或液滴穩(wěn)定性等關(guān)鍵質(zhì)量屬性。這種 QbD 方法將涉及開發(fā)有效的控制策略，以確�？鼓[瘤藥物的安全包封，以實(shí)現(xiàn)成功的產(chǎn)品開發(fā)。正確解決與規(guī)模放大相關(guān)的問題將推動(dòng)裝載抗腫瘤藥物的納米制劑的成功商業(yè)化。
簡介
基于納米技術(shù)的研究是在分子水平（顆粒尺寸約為 100 nm）對材料特性進(jìn)行操作的能力，這種多學(xué)科技術(shù)由創(chuàng)新驅(qū)動(dòng)，旨在提高人類生活質(zhì)量。納米技術(shù)在醫(yī)學(xué)中的作用已經(jīng)能夠?qū)崿F(xiàn)生物分子之間的有益相互作用，從而治療許多疾病。不僅納米級尺寸在醫(yī)學(xué)中發(fā)揮著決定性作用，而且相互作用的方式也影響著改進(jìn)療法的治療結(jié)果。
藥物中的納米技術(shù)對具有增強(qiáng)治療功效的差異化產(chǎn)品的制劑開發(fā)做出了深遠(yuǎn)的貢獻(xiàn)。應(yīng)用納米技術(shù)開發(fā)抗腫瘤藥物制劑，催生了腫瘤納米治療領(lǐng)域，在過去二十年中呈現(xiàn)出巨大的指數(shù)增長。與其它活性分子不同，抗腫瘤藥物存在細(xì)胞毒性問題，因此需要安全包封并能夠到達(dá)其目標(biāo)位點(diǎn)。納米顆粒的使用使所有這些成為可能。此外，納米顆粒還具有負(fù)載難溶性抗腫瘤藥物、保護(hù)活性部分免受惡劣體內(nèi)環(huán)境影響、持續(xù)釋放、改變其生物分布、靶向特定細(xì)胞/組織以及延長血液循環(huán)時(shí)間等獨(dú)特特征。盡管有大量關(guān)于開發(fā)抗腫瘤藥物納米顆粒的研究論文，但沒有多少論文進(jìn)入商業(yè)化市場。這是由于所使用的方法的可放大性較差。質(zhì)量源于設(shè)計(jì) (QbD) 方法的應(yīng)用推動(dòng)了標(biāo)準(zhǔn)化程序的開發(fā)，這些程序是制劑驅(qū)動(dòng)的，以獲得優(yōu)化的產(chǎn)品。規(guī)模放大此類納米顆粒的好處不僅可以改善傳統(tǒng)藥物的治療效果，還可以改善下一代藥物的治療效果。正確解決與規(guī)模放大相關(guān)的問題將推動(dòng)載抗腫瘤藥物的納米制劑成功商業(yè)化。
在這種背景下，本文強(qiáng)調(diào)了納米顆粒放大過程中面臨的一系列障礙以及克服這些障礙的可行性。與使用 QbD 原理相關(guān)的其它優(yōu)點(diǎn)包括對每個(gè)步驟的流程/單元操作有更好的清晰度和理解。這是一種科學(xué)驅(qū)動(dòng)的基于風(fēng)險(xiǎn)的方法，可確保更輕松的監(jiān)管流程，同時(shí)減少審批時(shí)間和所需的審計(jì)數(shù)量。美國 FDA 倡議采用基于風(fēng)險(xiǎn)的方法，利用完善的科學(xué)和知識空間來傳達(dá)加強(qiáng)對藥品工藝和產(chǎn)品的理解的概念。最好的部分是通過實(shí)時(shí)放行檢測以及適當(dāng)控制策略的監(jiān)控和總體一致的商業(yè)生產(chǎn)來彌補(bǔ)潛在的最小變化，從而實(shí)現(xiàn)所需的目標(biāo)屬性。
由于聚合物納米顆粒具有包封能力、提供隱形特性、雙重負(fù)載以及通過連接配體實(shí)現(xiàn)靶向的能力，因此它們比其它新型藥物遞送系統(tǒng)更受歡迎。此外，新型可生物降解聚合物的多樣性和開發(fā)使得研究藥物的保留時(shí)間和細(xì)胞吸收變得更加有趣。即使擁有如此多的優(yōu)勢，但由于臨床試驗(yàn)中產(chǎn)生的毒性、臨床前研究中沒有選擇合適的模型以及未能在工業(yè)規(guī)模上重現(xiàn)結(jié)果，很少有產(chǎn)品能夠進(jìn)入市場。為了開發(fā)商業(yè)認(rèn)可的優(yōu)質(zhì)產(chǎn)品，選擇正確的實(shí)驗(yàn)?zāi)Ｐ头浅Ｖ匾�。選擇正確的實(shí)驗(yàn)?zāi)Ｐ瓦�將減少規(guī)模放大過程中的時(shí)間浪費(fèi)，提供具有成本效益的生產(chǎn)、開發(fā)更省時(shí)的方法以及有時(shí)限的產(chǎn)品上市。
“均質(zhì)化”（homogenization）一詞源自希臘語“均質(zhì)”（homos + genos）； homos 表示相同或偶數(shù)，genos 表示同類。因此，均質(zhì)化是形成均勻分布顆粒的過程。這通常使用稱為均質(zhì)機(jī)的儀器來完成。在制藥工業(yè)中，這些均質(zhì)機(jī)廣泛用于減小粒徑和形成均勻分布的乳液、分散體或懸浮液。該過程中產(chǎn)生的高能量導(dǎo)致顆粒尺寸減小，并將較大顆粒分解成較小顆粒。提供如此高能量的不同類型的儀器包括轉(zhuǎn)子-定子均質(zhì)機(jī)、高功率超聲波發(fā)生器、高剪切均質(zhì)機(jī)、高壓均質(zhì)機(jī)等。 HPH儀器廣泛應(yīng)用于生物技術(shù)、制藥和食品工業(yè)。
任何商業(yè)規(guī)模批次的成功在于能夠滿足所有質(zhì)量參數(shù)，尤其是實(shí)驗(yàn)室規(guī)模期間顯示的質(zhì)量控制測試。系統(tǒng)性規(guī)劃的關(guān)鍵質(zhì)量屬性（CQA）和適當(dāng)?shù)脑O(shè)計(jì)空間可以促進(jìn)這一點(diǎn)。
根據(jù)定義，CQA 是物理、化學(xué)、生物或微生物方面表現(xiàn)出的特性，需要將其控制在一定范圍內(nèi)，以確保最終產(chǎn)品的預(yù)期質(zhì)量。然而，CQA 不僅僅是分析測試，因?yàn)樗鼈兪顷P(guān)鍵限值，當(dāng)保持在適當(dāng)?shù)南拗狄韵聲r(shí)，將為產(chǎn)品帶來所需的結(jié)果。此外，CQA 可以說是實(shí)施 QbD 過程中最困難的一步。在此背景下，本文重點(diǎn)介紹在 HPH 工作期間確定關(guān)鍵工藝步驟的方法，以獲得所需產(chǎn)品質(zhì)量且可規(guī)模放大。
QbD 方法
在 QbD 方法中，建立質(zhì)量目標(biāo)產(chǎn)品概況（QTPP）將是產(chǎn)品開發(fā)周期中獲得所需質(zhì)量特性的第一步。此階段涉及為給定藥品分配明確定義的屬性。在 QTPP 中，CQA成為一個(gè)子集，定義了涉及產(chǎn)品開發(fā)的少數(shù)關(guān)鍵參數(shù)。可能會(huì)根據(jù)原材料和工藝的變化而改變的關(guān)鍵參數(shù)，如圖1所示。必須在產(chǎn)品開發(fā)階段對此進(jìn)行觀察和評估，以確保藥品保持在安全有效的水平內(nèi)。
圖1. 使用 HPH 進(jìn)行產(chǎn)品開發(fā)中 QbD 的生命周期。
對于任何優(yōu)質(zhì)產(chǎn)品，工藝技術(shù)中引入的原材料的特性起著至關(guān)重要的作用。例如，輸入材料需要被標(biāo)識為關(guān)鍵材料屬性（CMA）。過程中的材料屬性被視為一步工藝的 CQA，這將成為下游生產(chǎn)過程的 CMA。關(guān)鍵工藝參數(shù)（CPP）的識別成為生產(chǎn)工藝參數(shù)的一部分，最終將原料藥的風(fēng)險(xiǎn)評估歸因于產(chǎn)品的開發(fā)。
關(guān)鍵材料屬性：識別和優(yōu)化
本節(jié)討論關(guān)鍵材料屬性（CMA）、其在抗腫瘤藥物選擇中的識別和優(yōu)化，以及產(chǎn)品開發(fā)中賦形劑和乳化系統(tǒng)的選擇。對于任何產(chǎn)品開發(fā)，如果我們考慮原料藥屬性的關(guān)鍵要素以及藥品關(guān)鍵質(zhì)量屬性，那么固態(tài)形式和粒徑將是影響最終產(chǎn)品有效性的主要關(guān)鍵材料屬性。識別和優(yōu)化這些關(guān)鍵材料屬性非常重要。在優(yōu)化階段需要深入了解材料、其化學(xué)性質(zhì)、作用機(jī)制、分子水平的復(fù)雜性。用于生產(chǎn)劑型的技術(shù)以及正確的材料選擇對產(chǎn)品質(zhì)量產(chǎn)生巨大影響。
抗腫瘤藥
作用于腫瘤細(xì)胞的藥物可分為四種類型：細(xì)胞毒性藥物、疫苗、內(nèi)分泌（激素）治療以及用于靶向治療的小分子/抗體。在選擇候選藥物期間，制劑設(shè)計(jì)師應(yīng)考慮以下因素。
1.候選藥物應(yīng)具有潛在的劑量范圍和在目標(biāo)位點(diǎn)的作用機(jī)制。
2.應(yīng)解釋該化合物的多晶型。
3.需要研究已開發(fā)制劑規(guī)模放大的可能性。
4.它應(yīng)該是一種商業(yè)上可持續(xù)的產(chǎn)品，造福人類生活。
5.通過產(chǎn)品內(nèi)在的新穎方法，開發(fā)的產(chǎn)品應(yīng)該顯示出更有效且安全的療法。
圖2描述了開發(fā)抗腫瘤納米產(chǎn)品時(shí)選擇藥物和輸送系統(tǒng)時(shí)需要選擇的參數(shù)。藥物開發(fā)過程基于兩種方法，即基于結(jié)構(gòu)的方法和基于靶標(biāo)的方法。在基于結(jié)構(gòu)的方法的情況下，藥物設(shè)計(jì)的概念及其選擇取決于藥物結(jié)構(gòu)相互作用及其各自的目標(biāo)受體如何指示治療效果。這可以通過NMR和 X 射線晶體學(xué)來解釋。基于靶標(biāo)的方法根據(jù)其與特定疾病指示的相應(yīng)目標(biāo)受體結(jié)合的能力來確定。計(jì)算機(jī)輔助藥物設(shè)計(jì)（CADD）用于通過該軟件研究藥物分子與目標(biāo)受體之間可能的相互作用。
圖2 .開發(fā)抗腫瘤納米產(chǎn)品以選擇藥物和輸送系統(tǒng)時(shí)需要選擇的參數(shù)。
許多研究人員還探索了另一種方法，即使用QSAR 的基于配體的藥物設(shè)計(jì)，即定量結(jié)構(gòu)活性關(guān)系 (QSAR) 機(jī)制。在這種方法中，生物分子上藥效團(tuán)的闡明傾向于靶向受體。這結(jié)合并改變了生物進(jìn)程以誘發(fā)疾病狀態(tài)。在靶向抗腫瘤部分期間需要鑒定藥物分子與基因的相互作用。這項(xiàng)研究被稱為藥物基因組學(xué)。這將有助于選擇正確的候選藥物及其目標(biāo)受體。該信息可進(jìn)一步用于了解該分子對目標(biāo)疾病的效力。靶點(diǎn)可以是受體、轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白、酶等，在病理反應(yīng)中發(fā)揮作用，和/或在信號轉(zhuǎn)導(dǎo)中發(fā)揮作用�？梢栽O(shè)計(jì)計(jì)算機(jī)模型來研究靶標(biāo)并驗(yàn)證疾病易感性。需要了解藥物代謝酶及其多態(tài)性的知識，以了解其基因的藥物穩(wěn)定性。代謝酶的例子有細(xì)胞色素 P450 (CYP)、乙醛氧化酶、單胺氧化酶 (MAO) 等。粘附并促進(jìn)生物分子運(yùn)動(dòng)的蛋白質(zhì)是膜結(jié)合轉(zhuǎn)運(yùn)系統(tǒng)，使候選藥物到達(dá)目標(biāo)位點(diǎn)�；钚晕镔|(zhì)的材料屬性應(yīng)具有承受高壓均質(zhì)技術(shù)所涉及的壓力的能力。在生產(chǎn)過程中，由于產(chǎn)生的強(qiáng)空化力和剪切力以及材料在此過程中受到的強(qiáng)烈能量，可能會(huì)觀察到成分的降解。某些分子（例如胰島素和酶）能夠承受過程壓力，但可能對溫度或熱量敏感。由于系統(tǒng)壁上脂質(zhì)吸附的干擾，脂質(zhì)層可能會(huì)丟失。
影響聚合物納米顆粒制劑中的粒徑和均質(zhì)過程成功與否的各種因素包括：
初始產(chǎn)品的均勻性
均質(zhì)機(jī)的設(shè)計(jì)
介質(zhì)的離子強(qiáng)度
過程中的循環(huán)次數(shù)及其壓力
過程溫度
賦形劑含量和組成，特別是聚合物和脂質(zhì)
控制上述所有因素將確保穩(wěn)定性、效力和產(chǎn)品完整性。圖2給出了開發(fā)抗腫瘤納米產(chǎn)品所需選擇的參數(shù)，以便于選擇藥物和遞送系統(tǒng)。
賦形劑
在賦形劑中，聚合物在納米顆粒的制劑開發(fā)中發(fā)揮著最重要的作用。研究人員現(xiàn)在已經(jīng)能夠根據(jù)需要通過聚合、絡(luò)合或修飾官能團(tuán)來合成聚合物。這一概念增強(qiáng)了靶向藥物輸送，因此這標(biāo)志著治療功效的增強(qiáng)。聚合物的選擇主要基于藥物在聚合物中的溶解度，因?yàn)槿軇┤萘吭礁撸幬镓?fù)載潛力越高。
聚合物作為腫瘤化療中的藥物載體
聚合物現(xiàn)已成為腫瘤化療載體制劑開發(fā)的重要組成部分之一。就其聚合物特性而言，它們與藥物形成綴合物的能力有關(guān)。然而，它們提供包埋藥物長期持續(xù)和受控釋放的能力增強(qiáng)了治療方案。此外，能夠捕獲多種分子，從親水性和疏水性藥物到蛋白質(zhì)和肽，并具有可調(diào)節(jié)的藥物釋放。
聚合物制劑可以通過以下方式改善抗腫瘤藥物的遞送：
增加疏水性藥物的溶解度
降低腎濾過率，減少排泄，從而延長循環(huán)周期。
基因或任何種類的蛋白質(zhì)過早降解，從而產(chǎn)生藥物保護(hù)。
通過掩蔽、涂覆或屏蔽藥物遞送載體（例如使用PEG屏蔽納米顆粒），避免藥物進(jìn)入巨噬細(xì)胞攝取和網(wǎng)狀內(nèi)皮系統(tǒng)(RES)。
通過屏蔽或掩蔽表面來對藥物進(jìn)行涂層或表面保護(hù)。
減少多重耐藥 (MDR) 細(xì)胞的藥物外流。
被動(dòng)靶向藥物遞送并探索腫瘤結(jié)構(gòu)。這使得特定尺寸的納米顆粒的滲透性和保留性（EPR）增強(qiáng)，與正常組織相比，這些納米顆粒在腫瘤組織中會(huì)被更多地收集。
主動(dòng)靶向藥物遞送至過度表達(dá)腫瘤相關(guān)抗原。
聚合物納米顆粒是一種軟質(zhì)生物材料，可用于藥物遞送，因?yàn)槠浜铣蛇^程簡單，易于結(jié)構(gòu)改變以形成所需的靶向遞送特性或表面修飾以提高藥物負(fù)載功效等。在這里，可以增強(qiáng)生物分布，提高治療效果，因?yàn)樗鼈兙哂屑{米級尺寸，在膠體系統(tǒng)中具有生物相容性且通�？缮锝到�。抗腫瘤產(chǎn)品開發(fā)中探索的聚合物納米顆粒來源廣泛，如天然來源，如殼聚糖、膠原蛋白、明膠、葡聚糖，以及水溶性聚合物，如人血清白蛋白（HAS）、凝集素、聚氨基酸、聚乙二醇等。合成聚合物，例如可生物降解的聚（乳酸）（PLA）、聚（乙醇酸）（PGA）、聚（ε-己內(nèi)酯）（PCL）、共聚物聚（乳酸-乙醇酸）、N-（ 2-羥丙基）-甲基丙烯酰胺共聚物（HPMA）和聚（苯乙烯-馬來酸酐）共聚物、聚酰胺-胺（PAMAM）樹枝狀聚合物也廣泛用于腫瘤治療。在制劑開發(fā)過程中，藥物可以被包封或分散在聚合物基質(zhì)系統(tǒng)中，或者藥物可以附著到聚合物分子上以改進(jìn)抗腫瘤藥物的遞送。藥物釋放機(jī)制可能是通過聚合物基質(zhì)擴(kuò)散、表面或整體侵蝕、膨脹或刺激反應(yīng)傳遞。為了防止快速清除和酶消化，設(shè)計(jì)了使用聚合物介導(dǎo)的遞送系統(tǒng)控制活性物質(zhì)的釋放遞送。即使在針對作用部位的活性物質(zhì)方面，這些也顯示出巨大的潛力。例如：聚合物納米顆粒、聚合物膠束系統(tǒng)、聚合物-藥物綴合物和納米級水凝膠等等。Ren等人通過使用 HPH 的酸水解反應(yīng)開發(fā)了具有微晶纖維素的纖維素納米顆粒。在這項(xiàng)研究中，他們觀察了反應(yīng)中各種酸、酸-微晶(MCC) 比例、反應(yīng)時(shí)間和 HPH 過程中使用的循環(huán)以及各種壓力對納米顆粒質(zhì)量對影響。研究了所有這些參數(shù)對納米顆粒形態(tài)和熱穩(wěn)定性的影響。他們得出的結(jié)論是，反應(yīng)中的濃酸產(chǎn)生了直徑為 10 nm、長度為 150-200 nm的棒狀顆粒。隨著均質(zhì)循環(huán)次數(shù)的增加，形成的納米晶體尺寸減小。Gupta S 等人研究了HPH中，用于固體脂質(zhì)納米顆粒 (SLN) 系統(tǒng)各種表面活性劑系統(tǒng)，發(fā)現(xiàn)使用泊洛沙姆 188 (Pluronic F68) 可得到最小的粒徑和多分散系數(shù)以及最大的包封率。
表面活性劑/增溶劑
穩(wěn)定納米乳液的主要成分是根據(jù)其親水親油平衡（HLB）值選擇表面活性劑或增溶劑。它作為驅(qū)動(dòng)力，因?yàn)樗哂虚_發(fā)以油或水作為連續(xù)相的制劑所需的范圍，或者也可以選擇混合表面活性劑，從而提供穩(wěn)定制劑系統(tǒng)的理想混合物。 HLB值越高，體系越親水。 Chong 等人研究了 HLB 值 10-15 范圍內(nèi)的混合表面活性劑的影響，他們觀察到，分別使用 5 wt% 和 10 wt% 的表面活性劑時(shí)，液滴尺寸從 96.47-130.90 nm 減小到 88.95-112.20 nm。他們還對這些配制的乳液進(jìn)行了穩(wěn)定性研究，他們觀察到，HLB 值為 13 和 15 的乳液在 35 天的儲(chǔ)存過程中表現(xiàn)出不穩(wěn)定，因?yàn)橐旱纬叽绨l(fā)生了顯著變化。表面活性劑頭基大小的差異影響混合表面活性劑的協(xié)同效應(yīng)。研究表明，表面活性劑頭部較大基團(tuán)尺寸的差異會(huì)影響更大的協(xié)同效應(yīng)，因?yàn)樾》肿颖砻婊钚詣┛梢愿玫匕鼑拖嗪退嘀g的大表面活性劑界面。通過使用混合表面活性劑可以增強(qiáng)在分散介質(zhì)中的分散性和溶解度，這可以增強(qiáng)兩相之間的界面膜。 Chong 等人研究了混合表面活性劑對液滴尺寸的影響，結(jié)果表明，只要水相中表面活性劑濃度超過 7.5 wt%，且作為溶劑的甘油濃度超過 20 wt%，就可以得到液滴尺寸顯著減小的納米乳液。
溶劑體系
HPH 避免了有機(jī)溶劑的選擇，因此消除了殘留溶劑的監(jiān)管問題和產(chǎn)品概況的安全問題。甘油在制劑體系中用作共溶劑時(shí)，可以增加水相的粘度。因此，由于共溶劑在分散介質(zhì)中的溶解度，添加共溶劑可以減小液滴尺寸，因此該分散介質(zhì)降低了其粘度并產(chǎn)生更小液滴尺寸的系統(tǒng)。如果共溶劑同時(shí)具有親水性和疏水性，它們可以擴(kuò)散到表面活性劑的單層中，從而導(dǎo)致表面活性劑的最佳曲率、柔韌性和界面張力的變化。Vivek等人研究了不同濃度單硬脂酸甘油酯的應(yīng)用及其對制備的固體脂質(zhì)納米顆粒均質(zhì)壓力的影響。他們發(fā)現(xiàn)，5000psi -10000psi 的壓力范圍會(huì)減小納米尺寸顆粒范圍，并且由于均質(zhì)階段產(chǎn)生的空化力導(dǎo)致脂滴減小到納米尺寸范圍，因此可以觀察到。
乳化/分散系統(tǒng)的選擇
在 HPH 工藝和良好的乳化系統(tǒng)中，可實(shí)現(xiàn)的液滴尺寸取決于影響液滴破碎的破碎單元的流動(dòng)模式。這種破壞單元取決于進(jìn)入徑向擴(kuò)散器、反向噴射分散器和軸向噴嘴集合體的流動(dòng)引導(dǎo)。能量密度等于破碎單元中的壓降。增加壓力差或增加能量密度將導(dǎo)致液滴尺寸直徑減小，除非發(fā)生聚結(jié)。Juttulapa等人研究了可用作HPH 工藝乳化劑的各種果膠類型。研究表明乳液的液滴大小取決于果膠的甲氧基含量。在高甲氧基含量下觀察到較小的液滴尺寸和良好的穩(wěn)定性，這是由于良好的乳化性能。
原文：G.Soni, K.Kale, S.Shetty, et al., Quality by design (QbD) approach in processing polymeric nanoparticles loading anticancer drugs by high pressure homogenizer. Heliyon, 2020.
（中國粉體網(wǎng)編輯整理/青黎）
注：圖片非商業(yè)用途，存在侵權(quán)告知?jiǎng)h除
